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FV3000 掃描顯微鏡

  • 類 別:
  • 工業測量顯微鏡
  • 型 號:
  • FV3000
  • 訂貨號:
  • TP0000527

商品名稱:FV3000 掃描顯微鏡

  • 貨號:TP0000527

1、產品簡介

FLUOVIEW FV3000系列的設計目的是迎接現代科學中所提出的艱巨的挑戰。FV3000系列產品具有完成活細胞和組織成像所需的高靈敏度和高速度,從而可以為細胞、組織和較小的生物體完成2D到6D(x,y,z,t,λ,p)的從宏觀到微觀的成像操作。FV3000系列產品有一個直觀的且可以調整的用戶界面,可支持從圖像采集到圖像處理和分析的整個工作流程。在研發FV3000產品時,我們特別注意要滿足細胞生物學、腫瘤研究以及干細胞研究的需要。現在FV3000系列又新添了兩款正置配置,還可以隨時滿足神經科學、電生理學和發育生物學的需要。


2、產品特點

  • FV3000系列掃描單元

常規掃描振鏡和常規/共振混合式掃描單元

用戶可以選擇兩種不同類型的掃描單元:僅配常規掃描振鏡的FV3000,或者配有常規/共振混合式掃描的FV3000RS。 混合式掃描單元配有用于高精度掃描的常規掃描振鏡,以及非常適合高速成像的常規/共振掃描振鏡。常規掃描振鏡可讓奧林巴斯超高分辨率技術(FV-OSR)獲得低至120nm的分辨率以及高信噪比,并且具有精確的龍卷風和多點刺激以及100ms切換速度。 常規掃描振鏡能夠在2X變焦條件下每秒獲取16幀圖像。 共振掃描振鏡的掃描速度范圍為從512 x 512每秒30幀,到512 x 32每秒438幀。

不存在速度與視場之間的妥協

許多高速掃描方法存在對視場的限制,因此限制了其在多細胞大面積檢測方面的使用。 FV3000系列產品的共振掃描振鏡甚至在每秒30幀的視頻速度情況下亦可保持全1X視場。甚至在每秒438幀的速度下通過裁剪Y軸獲得更高速度。

大多數共振掃描振鏡只能在速度與視場之間做出妥協。 經過優化的FLUOVIEW系統可確保視場與信號強度之間無需妥協,因此可在細胞和組織的大背景下觀察動態樣本(如鈣成像)。小鼠血管內血小板結合形成血栓。 利用配有2通道 GaAsP光電倍增管的共振掃描單元以全幀每秒30幀獲得的圖像。 

甲醇固定的A431細胞,使用Abcam ERK1抗體 + ERK2抗體 (Alexa Fluor 488) ab208564,以及α微管蛋白抗體(Alexa Fluor 594) ab195889和DAPI標識。 樣本由Abcam提供。

  • 活細胞成像的優化

與標準常規振鏡掃描通過避免熒光激發轉化為產生活性氧的三重態方法相比,共振掃描極大地降低了光漂白和光毒性。 這些特點讓活細胞實驗更加穩健可靠。FV3000系列產品具備全面的高低范圍激光強度控制功能,系統可在樣本上使用最低規定量的激光功率。 選配激光功率監視器可在多日長時間延時成像過程中確保連續一致的激光功率。



  • TruSpectral檢測功能介紹

靈敏度與精確度兼具的全光譜系統

FV3000系列產品采用了奧林巴斯的TruSpectral檢測概念。 基于專利* 體相位全息 (VPH) 透射光柵和控制光線的可調式狹縫,FV3000和FV3000RS的光譜檢測具有較高效率,可讓使用者將每個單獨通道的探測波長選定為1nm。 

采用GaAsP光電倍增管的高靈敏度光譜檢測器(HSD)提升量子效率


高靈敏度光譜檢測器(HSD)能夠觀察由于過于不明顯而無法使用傳統型設備觀察的樣本。 GaAsP光電倍增管具有最大量子效率45%的2個通道,Peltier制冷可讓高S/N比例圖像在極低激發光照射下背景噪聲降低20%。


高效TruSpectral檢測系統


FV3000系列產品將全系統傳輸效率提升到新的層面,讓每個系統均具有全面光譜,提高總體靈敏度,并提高信噪比,實現多色彩共焦成像的改進提升。


采用16通道拆分的多通道TruSpectral檢測

TruSpectral高效率的設計和軟件可讓光譜檢測器在多通道波長模式下以陣列模式進行實時光譜拆分和后處理光譜拆分。 多通道模式有助于在活細胞實驗過程中確保一致的光譜拆分,以及在圖像獲取過程中分割復雜的熒光。 利用陣列4個不同通道的4種不同動態范圍,不論明亮還是微弱的光譜信號均可通過調整每個檢測器的靈敏度進行獨立分割。



  • 簡單直觀的軟件

簡單直觀的工作流程

可定制、可保存的布局能夠輕松按工作流程和實驗需求實現從簡單到復雜的界面定制。

布局

從選擇操作特定工具的偏好布局開始,實現從簡單到復雜的圖像獲取。

獲取條件

重新加載上次實驗的完美配置,獲得前后一致性。

獲取

通過活動比例、 強度調節顯示、量化興趣區(ROI)圖形繪制或光譜拆分顯示實現從簡單到復雜的圖像獲取,并提供數據備份功能提高安全性。

查看器

回顧已經生成的數據。 生成3D和4D圖像和動畫,實現深層次的探索和共享。

分析

利用在線和離線處理從圖像中提取數據。 分析工具包括奧林巴斯超高分辨率技術 (FV-OSR)和具有諸如反卷積、篩選、計數和測量以及一鍵批量處理功能的強大cellSens軟件。


TruSpectral探測的現場光譜拆分和實時處理

TruSpectral探測能力外加多通道模式意味著在圖像獲取過程中就可實現現場光譜拆分,實現復雜疊加光譜的實時處理。


CFP (內涵體,藍色),mAmetrine (質膜,綠色),mKO (細胞核,橙色) 和 mKeima (纖維狀肌動蛋白,紫色) 在延時成像過程中,拆分之前的活動圖像。


實時盲拆分圖像


精確的順序管理器和實時獲取

輕松處置復雜方案,并且實時控制可讓微秒精度掃描在多日延時過程中獲得毫秒級精度。


多區域延時、微孔板、和拼接的載物臺控制


微孔板成像對于諸多應用非常重要,孔導航器可為各類細胞培養器皿和定制板提供復雜、直觀的控制。 多區域延時和拼接能夠獲得穩健精確的延時數據。


硬盤記錄

顯微鏡在出廠時即配有硬盤驅動器(HDD)記錄功能。 所捕捉的圖像可自動保存在硬盤驅動器(HDD)內。 諸如從長期延時成像獲得的大量數據均可保存。


利用cellSens實現強大的一鍵式批量分析


僅僅是成像還不夠; 利用集成cellSens軟件的計數和測量分析功能,FV3000系列產品能夠進行圖像反卷積優化,并使用一鍵批量處理功能對各種形態學測量進行分析。

表達Fucci2 NMuMG細胞系的球狀團塊圖像。


比例成像和 強度調節顯示(IMD)

FV3000RS在軟件中包含 強度調節顯示(IMD)功能,可在標準及高速圖像獲取過程中顯示量化熒光比例的變化。當純比例顯示無法在背景區獲得良好的對比時,該功能對于鈣和FRET成像特別有用。

tsGFP1-mito揭示了HeLa細胞中線粒體生熱作用的不均勻性。CCCP 37 °C處理前后tsGFP1-mito表達細胞中的比例圖像(ex 405 nm/ ex 488 nm)。 比例尺顯示10 μm (全圖) 和 3 μm (插圖)。


循環平均處理

為避免光毒性以較低激光功率進行高速掃描往往會降低信噪比。 通過采用循環平均后處理方式,使用者能夠在確保時間比例并保持原始數據的同時獲得調整高速延時圖像的靈活性。

(左) 以較低激光功率獲取的原始每秒30幀數據 (0.05 %,488 nm). (右) 對以較低激光功率獲取的每秒30幀數據的循環平均處理(10幀) 。


反卷積

選配約束迭代 (CI)反卷積解決方案采用先進的CI算法實現更高分辨率、相差、以及動態范圍,并且達到業內領先的速度。這種專有后處理工具足以應用于CCD和共焦成像,且提升了區分成像目標的能力。

細胞譜系:人宮頸癌細胞譜系HeLa細胞的免疫染色:Hec1染色(綠色,Alexa Fluor-488),α微管蛋白染色 (紅色,Alexa Fluor-568),DAPI 染色(藍色)由人宮頸癌獲得的有絲分裂HeLa細胞。有絲分裂紡錘體和著絲粒分別采用α微管蛋白抗體 (紅色) 和Hec1抗體 (綠色)染色。 染色體通過著絲粒,在染色體著絲粒區裝配的蛋白結構與構成有絲分裂紡錘體的微管進行交互作用。



  • 奧林巴斯超高分辨率 (FV-OSR) 

奧林巴斯應用范圍寬廣的超高分辨率解決方案對熒光探針沒有特殊要求,可用于各種樣本。 作為共定位分析的理想選擇,FV-OSR能夠以大約120nm的分辨率順序或同步獲取4個熒光信號*,幾乎達到常規共焦顯微技術分辨率的2倍。 該系統使用方便,用戶培訓要求極低,并可添加到任何共焦系統內,這讓FV-OSR成為實現超高分辨率真正可行的方法。*取決于物鏡倍率、數值孔徑、激發和發射波長、以及實驗條件。 

標記 GFP (Alexa Fluor 488,神經元) 和SV2 (Alexa Fluor 565,紅色)的二次抗體。 



  • 宏觀到微觀的觀察

找到樣本中的感興趣區域并非易事。 FV3000系列產品的共聚焦光學設計可支持宏觀到微觀成像,因此使用者能夠快速從1.25物鏡的低倍率觀察切換到最大150X物鏡的高倍率詳細觀察。 使用者在宏觀或微觀層面利用圖像拼接可生成在背景內顯示樣本的總覽圖像。

成年YFP-H 小鼠大腦冠狀面(30 μm厚)的拼接圖像,使用20X 物鏡(UPLSAPO20X)獲取. 



  • 優良的光學器件和剛性機架

適用于活細胞成像的硅油浸入式物鏡

奧林巴斯可提供四種能夠獲得優良活細胞成像效果的高數值孔徑硅油浸入式物鏡。 硅油的折射率 (ne ≈ 1.40) 與活組織的折射率 (ne ≈ 1.38)接近,這讓活組織深部高分辨率觀察能夠把因折射率不匹配造成的球面像差降到最低。 硅油不會干燥或硬化,因此無需加油,這讓其成為擴展延時觀察的理想選擇。


UPLSAPO30XS: 適用于更寬視野和更大深度

倍率: 30X,NA: 1.05 (硅油浸入式),W.D.: 0.8 mm, 

蓋玻片厚度: 0.13 - 0.19 mm,工作溫度: 23 - 37 °C

UPLSAPO40XS : 全面的倍率范圍

倍率: 40X,NA: 1.25 (硅油浸入式),W.D.: 0.3 mm, 

蓋玻片厚度: 0.13 - 0.19 mm,工作溫度: 23 - 37 °C 

UPLSAPO60XS2:適用于優良分辨率的3D觀察

倍率: 60X,NA: 1.30 (硅油浸入式),W.D.: 0.3 mm, 

蓋玻片厚度: 0.15 - 0.19 mm,工作溫度: 23 - 37 °C 

UPLSAPO100XS: 適用于在精確界定區域內進行更大深度的觀察

倍率: 100X,NA: 1.35 (硅油浸入式),W.D.: 0.2 mm, 

蓋玻片厚度: 0.13 - 0.19 mm,工作溫度: 23 - 37 °C



折射率對于深部組織觀察十分重要

在深層組織觀察中,圖像質量取決于確保樣本與浸液的折射率盡可能彼此接近。在采用硅油浸入式物鏡時,樣本與硅油的折射率差別極小。 因此能夠在深層組織上以較高分辨率獲得明亮的熒光圖像。


PLAPON60XOSC2: 提高共定位分析的可靠性

這種油浸入式物鏡將405 - 650 nm光譜范圍的側向與軸向色差降低到最低限度。 共定位圖像能夠得到可靠獲取,且以優良定位精度對圖像進行測量。 該物鏡還可通過最大850nm的近紅外光譜對色差進行補償,這讓其成為量化成像的理想選擇。

低色差物鏡 

倍率: 60X 

NA: 1.4 (油浸入式) 

W.D.: 0.12 mm 

色差補償范圍: 405 - 650 nm 

每個物鏡均提供光學數據。

PLAPON60XOSC2和UPLSAPO60XO的性能對比


利用IX83滿足穩定性要求

安裝在物鏡轉盤附近的Z-傳動導向件將較高的熱硬度與環繞式結構的穩定性結合一體,大幅度降低了熱和振動的影響,改善了延時成像的品質。



明亮條件下的高對比度

umbra裝置專為熒光觀察而特別設計。 其能夠有效阻擋室內光線,提高熒光對比,并可在明亮條件下獲得清晰的熒光觀察效果。



  • 模塊化

掃描器

混合式掃描單元(共振/3£1?振鏡)

該混合式掃描器將常規掃描振鏡與共振掃描結合在一起,能夠以全視場每秒30幀速度以及512 x 32每秒最大438幀的速度實現高速成像。 順序管理器讓同一實驗內共振掃描和常規振鏡成像之間的自動切換更加簡單。

常規振鏡掃描單元

僅配有常規振鏡的掃描器能夠以 512 x 512實現從每秒1幀到每秒16幀的精確掃描。 高速多點刺激或檢測實驗能夠以超過100 Hz頻率在多個細胞之間進行,并且以高達500 kHz的頻率輸出數據。


光譜檢測器

采用 TruSpectral技術的高靈敏度光譜檢測器 (GaAsP光電倍增管)

該2通道高靈敏度光譜檢測器(HSD) 采用與光譜檢測器(SD)相同的體相位全息光柵(VPH)技術,使用 Peltier制冷GaAsP 光電倍增管,量子效率可高達45 % 且可檢測范圍達到750 nm。 該設備可結合 2通道光譜檢測器 (SD)使用,以獲得靈活的動態范圍,也可配合第二臺2通道高靈敏度光譜檢測器(HSD) 使用,獲得強大的4通道靈敏度。

采用 TruSpectral技術的光譜檢測器 (多堿光電倍增管)

該2通道光譜檢測器采用高效率的VPH透射光柵,檢測波長范圍400 - 800 nm,1 - 100 nm 帶寬可調式狹縫。這種多堿光電倍增管(PMT)能夠實現最大800 nm的寬廣動態范圍。


激光耦合器

主激光耦合器

主激光耦合器是激光系統的核心部件。 四束標準激光,并可添加第五束激光,或留出一個開放端口用于通過副激光耦合器添加額外三束二極管激光器。

副激光耦合器

任何時候均可為該選配耦合器添加最多3個二極管激光器,結合主激光耦合器達到最大7根激光線路。


照明單元

傳統型照明模塊設計用于長持續時間的延時實驗。 由于光可通過光纖傳輸系統導入,因此熱量不會傳送到顯微鏡。


光源/U-HGLGPS

經過預對中的熒光照明光源無需調整,并且平均使用壽命可達2000小時。


透射光檢測器/FV31-LETD

該裝置采用外置透射光光電倍增管檢測器和LED傳統型照明,激光掃描和傳統透射光Nomarski DIC觀察均可使用。 使用者可進行同步多通道共聚焦熒光成像和透射光DIC獲取。


系統部件

從以下選配方案選擇可現場升級的激光自動對焦、快速精確的電動載物臺控制、模擬輸入/輸出和TTL同步的、以及方便的防震平臺。

Z軸漂移補償系統/IX3-ZDC2

IX3-ZDC2采用光毒性極小的紅外光(1級激光)探測樣本平面位置。 單次自動對焦 (AF)模式可根據需要對較深樣本設定多個焦點位置,實現多位置實驗的高效 Z-stack獲取。 連續AF模式可確保所感興趣的觀察面精確位于焦點上,避免了因溫度變化或添加試劑導致的焦點漂移,這讓其成為對焦要求更為嚴苛測量的理想選擇。另外,光學補償的增加讓針對塑料器皿或使用干燥物鏡的連續自動對焦成為可能。 IX3-ZDC2還可兼容硅油浸入式物鏡使用(以AF模式)。


IX3/IX3-SSU的超聲波載物臺

超聲波載物臺具有改善精度的低熱漂移特性,并能夠使用軟件和觸摸屏進行控制,方便獲得快速、可靠的多區域成像。

 

IO接口盒/FV30-ANALOG

該設備可通過模擬輸入支持電生理實驗,并支持TTL I/O。 接口盒可將電壓轉換為能夠以與熒光圖像相同方式處理的圖像。 

  

簡易防震臺/FV31-AVP

這種簡易防震臺與FV3000的占用空間相適應,是無需全防震工作臺應用的緊湊空間解決方案。


全球支持

安裝通常僅需一天時間,快速實現系統的啟動和運行。 我們利用全球知識庫為產品提供服務支持。 奧林巴斯應用專員可幫助您選擇能夠根據應用情況優化系統的功能特性。 共聚焦系統是資產投資,確保系統以最佳性能運行非常重要。 我們的認證服務團隊可快速安排調整規程和系統診斷,讓您的系統保持在最佳狀態,并排查任何問題。


3、技術規格


FV3000FV3000RS

主激光耦合器紫外光/可見光激光器405 nm:50 mW,488 nm:20 mW,561 nm:20 mW,640 nm:40 mW 
一個選配激光端口,可用于副激光耦合器或選配的激光設備
選配激光器副激光耦合器最多3個激光設備,如下所述: 
445 nm:75 mW,514 nm:40 mW,594 nm:20 mW,通過光纖與主激光耦合器連接
單個激光器設備445 nm:75 mW,514 nm:40 mW,或594 nm:20 mW,直接與主激光耦合器連接
激光控制內置AOTF系統的主激光耦合器,可快速切換激光,并調制各個激光強度,連續可調激光強度(0.1 % ~ 100 %,步進值為0.1 %) 
借助ND濾光片的10 %或最大100 %的激光功率變換器
掃描單元掃描方式2個鍍銀常規掃描振鏡2個鍍銀常規掃描振鏡; 
1個鍍銀共振掃描振鏡和1個鍍銀常規掃描振鏡
常規振鏡掃描單元 
(常規成像)
掃描分辨率:64 × 64像素到4096 × 4096像素 
掃描速度(單向):512 × 512,時間為1.1秒 ~ 264秒;像素時間為2微秒 ~ 1000微秒 
掃描速度(雙向):512 × 512,時間為63毫秒 ~ 250毫秒;256 × 256,時間為16毫秒 ~ 125毫秒 
光學變焦:1X ~ 50X,增量為0.01X 
掃描旋轉:自由旋轉(360度),步距為0.1度 
掃描模式:PT、XT、XZ、XY、XZT、XYT、XYZ、XYλ、XYZT、XYλT、XYλZ、XYλZT 
感興趣區域掃描、矩形剪裁、橢圓形、多邊形、自由形狀、線、自由線及點、龍卷風模式
共振掃描單元 
(高速成像)
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