用于測量細胞培養(yǎng)物或組織中氧濃度的通用系統(tǒng)

適用于 2D或3D細胞培養(yǎng)中的體外缺氧條件（例如，腫瘤模型或代謝研究）

非侵入性和實時測量

幾秒鐘內(nèi)快速測量

高空間分辨率

系統(tǒng)包括：用于產(chǎn)生和處理氧依賴性磷光壽命信號的光電硬件和軟件。控制器，探測器單元，LED光源，適配器套件，濾光片立方體，PC軟件

 + 

ibidi OPAL控制器    + OPAL探測器單元，濾光片立方體和LED光源

應用：

  精確測量細胞培養(yǎng)物或組織中的絕對氧濃度

  適用于 2D或3D細胞培養(yǎng)中的體外缺氧條件（例如，腫瘤模型或代謝研究）

  測量氧氣消耗或產(chǎn)量

    ibidi OPAL光學O 2測量系統(tǒng)可以對細胞，組織和球體的細胞外和細胞內(nèi)環(huán)境中的絕對氧氣值進行定量，實時監(jiān)測。該系統(tǒng)使用磷光壽命來通過氧敏感的熒光團以細胞不可滲透的聚苯乙烯珠或細胞可滲透的納米顆粒的形式測量氧濃度。

    在活細胞成像測定期間，使用階段頂部孵育系統(tǒng)來控制氧氣和二氧化碳水平; 然而，細胞簇附近或細胞簇中的氧濃度通常低于孵育室中的氧濃度（圖1）。對實驗樣品中或附近的精確氧含量的了解通常對于準確理解細胞活性是必不可少的。

控制和測量氧氣水平是許多研究應用的關鍵因素，因為細胞和組織的生理環(huán)境中的水平遠低于空氣中的水平。

ibidi OPAL系統(tǒng)可輕松連接熒光顯微鏡。

與顯微鏡的兼容性

  ibidi OPAL系統(tǒng)可以連接到尼康，奧林巴斯，徠卡和蔡司的所有現(xiàn)代倒置熒光顯微鏡。需要進行小的調(diào)整，在此過程中，ibidi將全面支持您。這些改編包括專用的OPAL濾光片組和用于顯微鏡的LED光源耦合器（包含在ibidi OPAL系統(tǒng)中）。OPAL檢測器單元適合標準C-Mount相機端口，或者也可以使用目鏡適配器安裝。

細胞外O2監(jiān)測

  氧氣監(jiān)測定義為培養(yǎng)細胞直接鄰域中O 2的測量值。直徑為50μm的氧敏感珠（CPOx）與ibidi OPAL系統(tǒng)或PLIM顯微鏡組合使用以測量氧濃度。

  CPOx-Beads具有氧反應性熒光團

  50μm聚苯乙烯珠粒是不可滲透的并且保留在細胞培養(yǎng)基中以監(jiān)測細胞外氧水平

  使用具有集成OPAL系統(tǒng)的熒光顯微鏡光學獲得結(jié)果

  CPOx-Beads還兼容磷光壽命成像顯微鏡（PLIM）

細胞內(nèi)O2測量

  對于細胞內(nèi)氧測量，將氧敏感納米顆粒試劑帶入細胞中。所述ibidi OPAL系統(tǒng)或PLIM顯微鏡揭示了定量? 2個通過識別中的氧傳感器（例如，安捷倫MitoXpress的壽命的變化濃度?幀內(nèi)）。

  氧傳感器含有氧反應性熒光團

  細胞滲透性納米顆粒能夠通過胞吞作用監(jiān)測細胞內(nèi)氧水平

  使用具有集成OPAL系統(tǒng)的熒光顯微鏡光學獲得結(jié)果

  細胞內(nèi)氧傳感器（例如，安捷倫MitoXpress ?內(nèi)部）也與PLIM兼容

O2監(jiān)測和O2成像

細胞培養(yǎng)基中的耗氧量

在μ-Slide VI 0.4（目錄號80606）中用CPOx-珠子接種細胞（3× 10 5個細胞/ ml ）。孵育系統(tǒng)中的氧濃度設定為5.1kPa至19.5kPa。使用OPAL系統(tǒng)進行的位點分辨測量顯示細胞培養(yǎng)基中的氧水平不等于孵育系統(tǒng)的設定值。培養(yǎng)基中細胞的氧消耗量太大，無法在氣相和液相之間建立平衡。

使用ibidi加熱和培養(yǎng)系統(tǒng)控制細胞成像環(huán)境

  為了提供進行細胞氧水平研究的最佳條件，ibidi系統(tǒng)包括以下組件：

  氣體混合器可實現(xiàn)最佳的CO 2和O 2水平

  加濕柱在離開控制器時對混合氣體進行加濕

  溫度控制器，穩(wěn)定均勻一致

  帶加熱板的舞臺頂部腔室消除了冷凝，實現(xiàn)了出色的相襯成像